1、生物膜的定义

（1）细菌生物膜的定义：细菌生物膜是相对单个分散状态的细菌生存模式而言的一种独特的细菌生存形式，由微菌落和细菌分泌的水化聚合基质组成，是一种成分复杂的粘液样物质。细菌生物膜形成过程是细菌与材料表面接触附着，在材料表面形成菌落，菌落生长包埋于胞外脂多糖基质中。生物膜一旦形成，则难以去除，并在“使用——再处理——使用”循环过程中逐渐累积，当生物膜积累到一定厚度，消毒及灭菌程序均难以杀灭包裹于其中的细菌。

（2）滞留细菌：生物膜中总有少量细菌不能被消毒剂杀灭，这些少量的细菌称之为滞留细菌。生物膜对各种杀菌因子不敏感和生物膜中滞留细菌的存在有关。滞留细菌数量极少，先前就存在于细菌群落中，一般处于不生长状态。滞留细菌对外界环境的变化具有特殊的抵抗力，在大量常态细菌死亡后仍能存活，并且保证菌群能够继续传代繁衍。正因为滞留细菌对杀菌剂具有很高的耐受性，生物膜被杀菌剂作用后，其中存活的少量滞留细菌又能重新分裂繁殖并重新形成生物膜。

2、生物膜主要结构包括：

• 细菌：对人体是致病的，同时也是人体的一种异物

• 水份含量：97%

• 关键成分是分泌的胞外多聚物包括：

• 胞外多糖(典型特征) extracellular polysaccharide，EPS

• 糖蛋白

• EPS在细菌形成生物膜结构、免疫逃避和毒力发挥中起重要作用

• 吸附：营养物质，代谢产物，细菌裂解产物

• 其它含有：蛋白质、多糖、DNA、RNA、肽聚糖、脂和磷脂等

3、哪些情况易生长生物膜

（1）体内医疗移植物、埋植剂。

（2）物体表面：病房、浴室表面。

（3）换气系统。

（4）供水系统。

（5）诊疗设备（内镜、口腔科诊疗床、气管导管、透析机、感应式洗手装置）。

（6）慢性病伤口：糖尿病性溃疡、耳道感染、囊肿性纤维化。

二、生物膜的预防与祛除

1、生物膜的预防控制策略

（1）及时进行医疗器械的预处理

手术器械使用后进行预处理可以使器械保湿，黏附在器械上的污垢、残留物松解，从而使清洗步骤更有效[7]。

（2）防止有机污染物干涸

尽早清洗使用后的器械，采用一切措施防止血液和组织结块。使用后立即进行浸泡。以酶为基础的保湿，可以快速高效分解有机污染物。

（3）注重清洗剂的选择和合理应用

应选择有机物和生物膜清除能力更佳，对器械腐蚀力更小，环保的清洗剂产品并严格按照相关管理办法及标准执行。

（4）保证器械干燥

保证器皿、器械管腔和关节干燥彻底，特别对于隔夜存放的高水平消毒类器械。加强对内镜储存环境的温湿度管理。

（5）加强清洗质量检测

清洗是指去除医疗器械、器具和物品上污物的全过程，包括冲洗、洗涤、漂洗和终末漂洗四个阶段。根据WS310.2-2009医院消毒供应中心（第2部分）第5.6.1规定，器械经过清洗后，必须符合清洗质量标准，即器械表面及关节、齿牙处应光洁、无血渍、污渍、水垢等残留物质和锈斑；功能完好，无损毁。

2、生物膜的祛除方法

（1）器械表面预处理：抗菌涂层、离子束预处理、表面活性剂预处理。

（2）使用化学制剂、噬菌体等抑制生物膜基质的生长。

（3）强效灭菌剂杀死细菌，然而通常不容易奏效。

1、生物膜监测的方法

（1）细菌培养法：（内镜等管腔器械）冲洗水细菌培养法、涂擦采样细菌培养法

（2）ATP或PCR涂擦采样分析

2、当前生物膜监测方法存在的缺陷

（1）生物膜形成初期往往较为局限，涂擦采样部位相对又比较局限，不一定能采到生物膜。对一些大型仪器设备更是如此，例如自动清洗机。

（2）即便采到细菌，在实验室培养条件下往往难以长出生物膜态细菌，细菌生物膜性状改变。

（3）细菌培养法，只能提示是否有残留有存活细菌，对于细菌是否处于休眠期或者死掉的细菌是否已经从物体表面（如内镜管腔内壁）去除，无法获知。

（4）死掉的且仍然固着于物体表面的细菌，对于尚存活的细菌来说是营养基质。

（5）ATP和PCR分析，均需要一定数量的细菌，才能产生足够的光信号。

3、生物膜对清洗的耐受性

（1）常规清洗方法，无法去除生物膜；

（2）干燥8个月后，生物膜仍能恢复生长；

（3）生物膜可以耐受80摄氏度甚至更高温度的水洗；

（4）生物膜可以耐受20,50,200ppm有效氯消毒剂和25ppm碘伏的处理。